Регенерация дентина


Регенерация и реактивные свойства ткани пульпы. Изучение биологии пульпы, в частности ее реактивных свойств и способности к регенерации, имеет не только теоретический интерес, но и большое значение для практики зубоврачевания. Оно определяется прежде всего необходимостью выработки более совершенных методов лечения воспалительных заболеваний пульпы. Принятые в настоящее время методы лечения пульпитов посредством экстирпации или ампутации пульпы в сочетании с применением различных антисептических веществ далеко не всегда предохраняют околозубные ткани от возможности проникновения в них инфекции и развития осложнений в виде периодонтитов и т. п. Кроме того, само удаление пульпы приводит к частичному или полному умерщвлению зуба. В основе этих методов лечения пульпитов, которые А. Рывкинд назвал в свое время методами «расправы» с корневой пульпой, лежит представление о малой жизнеспособности пульпы зуба, отсутствии у нее всяких регенераторных свойств. Поэтому воспаленная или даже случайно обнаженная пульпа, по мнению сторонников этого взгляда, неизбежно погибает и должна быть удалена. Причину малой жизнеспособности пульпы и неспособности ее противостоять действию различных вредных агентов многие авторы видели в анатомических особенностях этого органа, заключенного в плотную коробку с толстыми неподатливыми стенками, в наличии в ней концевых артерий и постоянного застоя венозной крови вследствие сдавления сосудов в узком верхушечном отверстии.


Приведенные выше исследования Е. И. Гаврилова в значительной мере подорвали представление Фишера и других авторов о пульпе как о «застойном орлане», которому якобы и в норме свойственны глубокие патологические изменения. Сложившееся мнение о неполноценности ткани пульпы и неспособности ее к реактивным изменениям было также поколеблено после открытия в ней элементов ретикуло-эндотелиальвой системы — гистиоцитов и макрофагов, выполняющих в организме, а следовательно, и в пульпе зуба важную защитную или барьерную функцию. Эта защитная роль пульпы выражается не только в явлениях фагоцитоза, свойственных некоторым ее клеточным элементам, но и в способности ее одонтобластов к продукции дентина и других твердых тканей (остеодентина), которая сохраняется в течение всей жизни зуба взрослого организма.

Примером этой пластической и вместе с тем защитной деятельности пульпы зуба может служить образование вторичного, или заместительного, дентина при кариесе, повышенной стираемости зубов, о чем была речь в главе о дентине.


Интересную попытку использовать это свойство пульпы зуба (ее пластическую функцию) при лечении пульпитов сделал в свое время Г. Л. Фельдман. Разработанный им метод заключался в нанесении на ампутированную пульпу дентинных опилок, которые, по мысли автора, должны были играть роль активаторов или катализаторов пластической функции пульпы. Г. Л. Фельдман считал, что основной биологической функцией пульпы зуба является не питание тканей зуба, а построение дентина. Эта функция свойственна не только пульпе развивающегося зуба, но сохраняется и в сформированном зубе в течение всей жизни организма, пока пульпа не истратит своих пластических свойств и не израсходует себя всю на окончательную дентификацию пульповой камеры и корневых каналов. Только после этого, т. е. после полной облитерации корневых каналов и пульповой камеры дентиноподобной тканью, «заканчивается круг физиологической деятельности пульповой ткани в онтогенезе».

Таким образом, по Г. Л. Фельдману, естественный цикл развития пульпы зуба заключается в постепенном превращении ее в дентин или дентиноподобную ткань. Г. Л. Фельдман фактически отрицал трофическую роль пульпы или ставил ее на задний план по сравнению с ее пластической, дентинообразующей функцией. «Пульпа как у собак, так и у травоядных перестала существовать как орган, ведающий питанием. Эта функция утеряна ею, по-видимому уже давно». Вряд ли с этим можно полностью согласиться. Если бы дело действительно обстояло так, то ни в одном взрослом, а тем более в старческом зубе мы :не смогли бы найти пульны, не говоря уже об одонтобластах.


Заболевания краевого пародонта у детей

В действительности же дело обстоит иначе. Работа A. A. Maниной  показала, что образование вторичного дентина в пожилом и старческом возрасте наблюдается лишь в 1/3—1/2 случаев. Как правило, сужение полости пульпы незначительно: из 174 исследованных ею зубов только в одном (в 43-летнем возрасте) было отмечено сужение полости пульпы за счет образования вторичного дентина. Нам также не удалось отметить в зубах 55—60-летних людей (погибших в результате несчастных случаев) каких-либо резких признаков замещения пульпы дентинной тканью. В ряде случае ткань пульпы была хорошо развита и обладала отчетливо выраженным слоем одонтобластов. Мало того, пульпа этих зубов была хорошо васкуляризирована и содержала большое количество нервных волокон и нервных окончаний.

Не отрицая важной роли пластической деятельности пульпы в биологии зуба, мы считаем, однако, что Г. Л. Фельдман значительно преувеличил и переоценил эту функцию пульпы, приняв, по-видимому, результаты усиленного раздражения зубной пульпы у жвачных (питающихся грубой пищей) и у человека при глубоком кариесе за выражение нормальной картины пульпы зуба взрослого человека.

Не оправдал себя, к сожалению, на практике и метод «биологического имплантата», предложенный Г. Л. Фельдманом. Гистологическая и клинико-рентгенографическая проверка этого метода не подтвердила возлагавшихся на него надежд.


Неудачи, которые потерпел метод Г. Л. Фельдмана на практике, и некоторые перегибы, допущенные им в оценке пластической функции пульпы, не должны, однако, заслонять от нас того ценного, что содержится в его взглядах, а именно мысли о том, что пульпа является тканью, наделенной всей полнотой жизненных свойств и способной противостоять при определенных условиях действию вредных агентов.

В пользу этого взгляда, помимо приведенных выше данных, говорят также экспериментальные работы Е. И. Гаврилова по изучению динамики воспалительной реакции пульпы, вызванной введением в нее инородного тела (целлоидинового штифта). При этих условиях в пульпе зубов собак, на которых ставил свои опыты Е. И. Гаврилов, возникает типичная картина воспаления (расширение кровеносных сосудов, лейкоцитарная инфильтрация, мобилизация местных гистиоцитов и образование новых из моноцитов и адвентициальных клеток), которая завершается образованием на 5—7-й день соединительнотканной капсулы в окружности инородного тела.

Этим самым очаг воспаления отграничивается от остальной пульпы, которая к этому времени приобретает свойственную ей в норме структуру. Воспалительная реакция в коронковой и корневой пульпе имеет свои особенности. В первом случае более сильно выражены процессы экссудации, во втором — преобладают явления пролиферации соединительной ткани, которые приводят к образованию более мощной фиброзной капсулы вокруг инородного тела. В более поздние сроки опыта (15—30 дней) в окружности инородного тела наряду с соединительнотканной капсулой было отмечено образование предентина.


рез 3 месяца от начала воспаления в области корневой пульпы было найдено отложение вторичного дентина, пронизанного дентинными канальцами. Таким образом, экспериментальное воспаление пульпы, вызванное введением инородного тела, закончилось не только полным выздоровлением, но и образованием в пульпе в окружности этого тела вторичного дентина. Последнее, по мнению Е. И. Гаврилова, должно рассматриваться как проявление специфической реакции соединительной ткани пульпы на раздражение.

Совершенно иной характер носила воспалительная реакция в тех случаях, когда введение инородного тела в пульпу сопровождалось ее инфицированием. При этом наблюдались более бурная лейкоцитарная инфильтрация пульпы и накопление большого количества макрофагов в окружности гнойного очага. Если инфильтрат локализуется, принимая форму ограниченного гнойного (абсцесса), то в окружности его образуется соединительнотканная капсула. При разлитой форме гнойного воспаления пульпы Е. И. Гаврилов отмечает подавление фибробластической реакции. Отсюда следует, что борьба с инфекцией по-прежнему является необходимой предпосылкой для проявления защитных сил пульпы и успешной ликвидации возникшего в ней воспаления.

Большой интерес представляют наблюдения Е. И. Гаврилова над течением воспалительной реакции в пульпе молочных зубов животных (щенков) после предварительного тотального облучения их рентгеновыми лучами (350 г).


ной из отличительных особенностей воспаления пульпы в этих условиях является резко выраженная отечность ее, зависящая, по-видимому, от увеличения проницаемости сосудистых стенок. Результатом отека пульпы является сдавление и гибель части одонтобластов. Соединительнотканная капсула вокруг инородного тела хотя и возникает, но значительно уступает по своим размерам той, которая развивается в пульпе зубов контрольных, необлученных животных. Вместе с тем реакция со стороны свободных макрофагов была выражена в значительной степени. Как указывает Е. И. Гаврилов, значительное повреждение пульпы, которое наблюдается при острой лучевой болезни, отягощает течение воспалительного процесса. Однако и в этих случаях воспаление пульпы нередко заканчивается ее «выздоровлением», что лишний раз свидетельствует о больших реактивных способностях ее ткани.

Источник: stomekspert.ru

Дентин зуба: общие сведения и структура

Дентин зуба

Дентин зуба образован несколькими видами ткани:


  1. Предентин. Окружает пульпу, имеет пористую структуру. Состоит из грушевидных клеток-одонтобластов, отростки которых обеспечивают доставку питательных веществ в эпителий зуба. Одонтобласты отвечают за чувствительность зубов, реакцию на холодное, горячее, сладкое.
  2. Дентинные трубочки и канальцы. Проходят через всю структуру дентина, от пульпы к периферии. Внутри они заполнены волокнами, обеспечивающими питание и обменные процессы во всех тканях зуба. Благодаря дентинным канальцам обеспечивается высокая проницаемость дентина, невзирая на его плотную структуру. Соответственно, пульпа быстро реагирует на повреждения болевым синдромом.
  3. Перитубулярный дентин. Выстилает полость всех канальцев и трубочек, отличается повышенным содержанием минералов. Если уровень минерализации снижается, перитубулярный дентин быстро разрушается, что приводит к расширению дентинных канальцев, повышению проницаемости тканей.
  4. Интерглобулярный дентин. Заполняет все пространство между трубочками дентина. Бывает 2 видов: околопульпарный (окружает пульпу) и плащевой (соприкасается с эмалью).

Биохимический состав и виды

Дентин зуба состоит из:

  • органических веществ (18 %) – липидов, аминокислот, коллагена, полисахаридов;
  • неорганических соединений (69 %) – фосфата кальция, фосфорнокислого магния, фторида кальция, углекислого натрия и кальция;
  • воды (13 %).

Такой биохимический состав обеспечивает высокую прочность (по этому показателю дентин превосходит все кости скелета), и вместе с тем упругость и эластичность биологического материала. Эмаль в 5 раз прочнее дентина, но она очень хрупкая. И только благодаря эластичности дентина, который является основой зубной коронки и выполняет функцию амортизатора, эмаль выдерживает жевательные нагрузки, сохраняет целостность при пережевывании твердой пищи и воздействии на зубы механических факторов.

Выделяют три разновидности дентина:

  1. Первичный. Формируется в период внутриутробного развития, сохраняется до момента прорезывания молочных зубов у ребенка.
  2. Вторичный (заместительный). Появляется в момент прорезывания зуба над десной, сохраняется на протяжении жизни.
  3. Третичный (иррегулярный). Образуется при травмах, заболеваниях, препарировании зуба в ответ на любое воспаление или внешнее раздражение, выполняет функцию защитного барьера. При этом изменяется структура ткани: канальцы в третичном дентине располагаются хаотично, а при сильном воспалении вовсе исчезают.

Функции и регенерация дентина

Расположение, гистологическая структура и биохимический состав твердой ткани обуславливают выполняемые ею функции. Дентин зуба:


  • формирует контуры и размеры зуба, определяет цвет зубов;
  • защищает эмаль от разрушения, а пульпу – от проникновения бактериальной инфекции;
  • обеспечивает питание и обменные процессы во всех тканях зуба;
  • отвечает за чувствительность зубов, своевременную реакцию пульпы на повреждение, проникновение инфекции, воздействие термических и механических раздражителей.

Благодаря клеткам-одонтобластам, дентин способен восстанавливаться. Но процессы регенерации происходят только в случае, если не нарушена нервная иннервации зубных тканей. Когда зубной нерв удаляют, процессы регенерации дентина прекращаются.

Болезни дентина зубов и их лечение

В стоматологии выделают следующие болезни, поражающие дентин зуба:

  • кариес;
  • повышенная стираемость эмали;
  • клиновидный дефект.
  • Также существуют генетические патологии, однако встречаются они значительно реже. К этой группе относятся дисплазия и наследственный опалесцирующий дентин. Для последнего характерна водянисто-серая, просвечивающаяся окраска зубов, их повышенная стираемость. При дисплазии отмечается постепенное разрушение всех слоев дентина, последующее изменение твердых тканей.

Кариес поражает дентин зуба

Регенерация дентина


Зубной налет, отсутствие гигиенического ухода и снижение уровня кислотности в ротовой полости, злоупотребление сладостями повышают вероятность кариозного поражения зубов. Степень минерализации дентина снижается, изменяется его структура. Отростки некоторых одонтобластов разрушаются. Развивается воспаление, которое при отсутствии своевременного лечения переходит на пульпу.

Кариес – самое распространенное заболевание дентина. По глубине поражения он классифицируется на:

  • средний (поражение распространяется до срединных слоев);
  • глубокий (повреждение дентина доходит практически до пульпы).

Лечение кариеса дентина направлено на сохранение не только целостности зубной коронки, но и нерва пульпы, поскольку после удаления нервного волокна прекращается регенерация зубной ткани.

На начальных стадиях кариеса, которые сопровождаются появлением на эмали белого или пигментированного пятна, проводится реминерализация с применением специальных составов, гелей, лаков. Насыщение зубных тканей фтором и кальцием позволяет остановить патологические процессы и предотвратить дальнейшее разрушение тканей.

Терапия среднего и глубокого кариеса проводится в условиях стоматологического кабинета, включает:

  • выполнение местной анестезии;
  • удаление поврежденных и инфицированных тканей;
  • антисептическую обработку зубной полости;
  • установку пломбы.

Патологическая стираемость зубов

Регенерация дентина

Возникает при неправильном прикусе, отсутствии некоторых зубов, постоянном воздействии на эмаль агрессивных веществ, дефиците витаминов и минералов в организме. Часто повышенная стираемость отмечается при бруксизме (непроизвольный скрежет зубами во сне). Сначала стирается слой эмали, затем разрушается дентин.

Лечение патологии зависит от причин, как правило, включает регулировку высоты зубного ряда с помощью кап, вкладок, временных протезов. Затем выдерживается адаптационный период, во время которого пациент привыкает к высоте коронок. При сильной болезненности высоту коронок уменьшают. На завершающем этапе проводится протезирование (чаще – несъемными протезами).

Клиновидный дефект

Регенерация дентина

Патология сопровождается нарушением целостности коронки, которое имеет вид буквы V или клина (отсюда название). Чаще всего отмечается поражение резцов и клыков, реже – малых коренных зубов. Точно причины развития нарушения не установлены, однако известно, что чаще с проблемой сталкиваются люди пожилого возраста.

Распознать клиновидный дефект можно по появлению на шейке зуба выемки размером от 0,1 до 5 мм, приобретении дефектом желтоватого оттенка. Также отмечается хрупкость зубной коронки (при надкусывании твердой пищи часть зуба может отколоться), болезненность при чистке, повышенная чувствительность на температурные и пищевые раздражители.

На начальных этапах развития патологии проводится реминерализирующая терапия с применением фторсодержащего лака, специальных зубных паст. Осуществляется пломбирование жидкими композитами, шлифовка зубов. В более тяжелых случаях проводится ортодонтическое лечение, удаление зуба, протезирование.

В основе профилактики болезней дентина лежит правильное питание и соблюдение гигиены ротовой полости. Чтобы укрепить зубные ткани и  предотвратить разрушение зуба, нужно обеспечить здоровое сбалансированное питание, обязательно включив в ежедневный рацион продукты с высоким содержанием магния, кальция, фосфора, витаминов А, Е, С, D, группы В. Важно соблюдать гигиену полости рта, использовать специальные зубные пасты и ополаскиватели. Обязательно проходить профилактические осмотры у стоматолога каждые полгода.

Источник: dentalzub.com

  1. Журналы
  2. Стоматология
  3. # 6, 2017
  4. Регенерация пульпы зуба с использован…

Традиционно в качестве лечения пульпита у взрослых пациентов применяется экстирпация — полное удаление пульпы с последующей обработкой и пломбировкой пульпарной камеры и корневых каналов. Подобным образом поступают и при случайном вскрытии пульпы или сколе зуба, нарушающем целостность пульпарной камеры. При пульпотомии происходит удаление всех клеток пульпы, включая одонтобласты, участвующие в формировании дентина, что приводит к повышению хрупкости зуба, нарушению его интеграции с окружающими тканями и в результате — к его полной утрате [14]. Восстановление жизнеспособной ткани пульпы зуба при нарушении целостности пульпарной камеры в отсутствие воспалительных процессов является важной клинической задачей, позволяющей сохранить зуб и избежать затратной и не всегда эффективной установки имплантатов. Для регенерации соединительной ткани пульпы могут быть использованы стволовые клетки, извлеченные из пульпы выпавших или удаленных зубов самого пациента или доноров (аллогенные).

В настоящее время выделены и подробно охарактеризованы культуры стромальных мезенхимальных клеток (МСК) из пульпы молочных и коренных зубов — описан их иммунофенотип, исследованы пролиферативная активность и дифференцировочный потенциал [6, 13]. Показано, что, как и МСК из других источников, клетки пульпы способны к дифференцировкам в остеогенном, хондрогенном и адипогенном направлении. Но помимо этих потенций, МСК пульпы способны также к нейрональной дифференцировке, что определяется происхождением данных клеток из эктомезенхимы — производной нейрального гребня [6, 8]. Трансплантация данных клеток позволит обеспечить надлежащую иннервацию и создаст условия для формирования жизнеспособной рыхлой волокнистой соединительной ткани пульпы.

Показано, что клеточные культуры МСК, полученные из пульпы, могут быть криоконсервированы и храниться в течение длительного периода без снижения пролиферативного и дифференцировочного потенциала с целью отдаленного применения для регенерации [1, 4, 10]. Подход, основанный на использовании заранее банкированных клеток самого пациента или донорского материала, позволяет в кратчайшие сроки произвести трансплантацию, что существенно повышает эффективность лечения.

В ряде работ было показано, что подкожная трансплантация клеток пульпы, иммобилизованных на скаффолдах и помещенных во фрагмент депульпированного зуба, приводит к формированию внутри такой конструкции ткани, схожей по строению с соединительной тканью пульпы [3, 5, 12]. Кроме того, участие стволовых клеток в регенерации пульпы было показано непосредственно на модели пульпоэктомии у лабораторных животных [16, 17].

В настоящей работе проведено исследование регенерации ткани пульпы при трансплантации аутологичных мезенхимальных стромальных клеток пульпы коренных зубов в составе фибринового сгустка в пульпарную камеру после пульпоэктомии у миниатюрных домашних свиней. Восстановление тканей пульпы зуба при нарушении целостности пульпарной камеры в отсутствие воспалительных процессов является перспективным направлением использования клеточных технологий.

Для получения культуры мультипотентных стромальных клеток (МСК) пульпы зуба у карликовых домашних свиней удаляли зуб под общей анестезией (золетил 15 мг/кг/рометар 2 мг/кг), исключали очаги воспаления и доставляли в лабораторию во флаконе с транспортной средой: F-12 («ПанЭко», РФ), 500 мкг/л амикацина (ОАО «Синтез», РФ), 10 Ед/мл гепарина натрия («Braun», Германия) при температуре 2—8 °С. Зуб обрабатывали 0,05% раствором хлоргексидина биглюконата (ООО «Росбио», РФ), раскалывали и извлекали пульпу. Ткани промывали раствором Хэнкса с добавлением 0,5 г/л цефазолина (ОАО «Синтез», РФ) (рис. 1),

Регенерация дентина
Рис. 1. Извлечение пульпы из зуба миниатюрной свиньи.

механически измельчали и инкубировали в растворе коллагеназы I типа (2 мг/мл; «ПанЭко», РФ) 60 мин при 37 °C. Полученную клеточную суспензию помещали в чашки Петри и культивировали в ростовой среде: ДМЕМ, 10% ЭТС, 2 mM L-глутамина, 100 мг/л амикацина при стандартных культуральных условиях (37 °С, 5% СО2), производя замену среды на свежую каждые 3 сут. Для экспериментального исследования использовали культуры на 3 пассаже, 60—80% конфлуентности.

Регенерация дентина
Рис. 2. Культура МСК пульпы зуба миниатюрной свиньи, 3 пассаж, ув. 200. Фазовый контраст.

Регенерация дентина
Рис. 3. Моляры и премоляры миниатюрной свиньи после трансплантации.

Регенерация дентина
Рис. 4. а — шлиф резца миниатюрной свиньи через 14 сут после резекции пульпы. Коронка содержит пломбированный канал до пульпарной камеры. Пульпа отсутствует; б — шлиф резца миниатюрной свиньи через 30 дней после резекции пульпы. Коронка содержит пломбированный канал до пульпарной камеры. Пульпа отсутствует. Окраска толуидиновым синим и кислым фуксином. Микроскопия в отраженном свете. Ув. 5.

Регенерация дентина
Рис. 5. а — шлиф моляра миниатюрной свиньи через 14 дней после трансплантации. В пульпарной камере обнаруживается клеточный трансплантат. В области устьев канала грануляционная ткань. Окраска толуидиновым синим и кислым фуксином. Ув. 5; б — шлиф премоляра миниатюрной свиньи через 30 дней после трансплантации. В пульпарной камере признаки регенерации пульпы с начальными признаками образования дентиновых мостиков. Окраска толуидиновым синим и кислым фуксином. Ув. 5; в — шлиф резца миниатюрной свиньи через 60 дней после трансплантации. В пульпарной камере признаки регенерации пульпы в области дна пульпарной камеры и со сформированным дентиновым мостиком. Окраска небесный трихром. Микроскопия в отраженном свете. Ув. 5; г — шлиф резца мини-атюрной свиньи через 60 дней после трансплантации. Отложение массива дентина в области дна пульпарной камеры. Окраска небесный трихром. Микроскопия в отраженном свете. Ув. 50.

Клетки имели характерный для мультипотентных стромальных клеток фенотип — вытянутую или полигональную форму, ядро с 2—3 ядрышками, небольшой размер (5—10 мкм) (см. рис. 1).

Для получения плазмы, обогащенной тромбоцитами (platelet-rich plasma, PRP), кровь миниатюрных свиней собирали в пробирки с ЭДТА, центрифугировали при 1100 об/мин в течение 10 мин. Тромбоциты, содержащиеся в супернатанте, осаждали центрифугированием при 3600 об/мин в течение 15 мин и ресуспензировали в половине объема супернатанта.

МСК снимали с чашек Петри раствором Версена с добавлением 0,25% раствора трипсина и центрифугировали 10 мин при 1100 об/мин. Осадок ресуспензировали в обогащенной тромбоцитами плазме крови с получением клеточной суспензии с концентрацией клеток 4 млн в 1 мл плазмы. Для образования фибрина из содержащегося в PRP фибриногена в систему добавляли по каплям тромбин («Cormay»), растворенный в 10% растворе хлорида кальция («ДальХимФарм»). Полимеризация происходила в течение 3—5 мин.

Эксперимент проводился на 3 миниатюрных свиньях светлогорской популяции на базе Научного центра биомедицинских технологий РАМН. У животных экспериментальной группы (3 свиньи, 18 моляров) моделировали случайное вскрытие пульпы с пульпотомией. Под общей анестезией (золетил 15 мг/кг/рометар 2 мг/кг) алмазным шаровидным бором наносили повреждения на жевательной поверхности моляров. Повреждения были сделаны на глубину 5,5 мм и удаление коронковой пульпы — пульпотомия — осуществляли острым стерильным экскаватором. Орошение вскрытой корневой пульпы осуществляли антисептическим раствором хлоргексидином биглюконата 0,5%. Гемостаз после удаления пульпы из полости зуба и устьев каналов осуществляли на основе 20% сульфата железа. После полной остановки кровотечения проводили покрытие «культи» пульпы трансплантатом, полость закрывали пломбой FUJI IX (GC, Япония). Через 2 нед (1-е животное), 4 нед (2-е животное), 12 нед (3-е животное) свиньи подверглись эвтаназии путем передозировки внутривенно (раствором золетила 100 мг/кг) в соответствии с Приложением № 4 к Правилам проведения работ с использованием экспериментальных животных (Приказ № 755 от 12.08.77) и был проведен забор блоков челюстей.

Образцы фиксировали в 70% этаноле в течение 15 дней. Затем обезвоживали и заливали в метилметакрилат (Osteo-Bead, Sigma-Oldrich) по стандартной методике, рекомендованной производителем с последующей полимеризацией. Из полученных блоков изготавливались первичные срезы 100 мкм (Isomet 100), из которых готовились шлифы толщиной 40—50 мкм, которые окрашивали кислым фуксином и толуидиновым синим, а также небесным трихромом.

Окрашенные шлифы подвергали микроскопии и документировали с помощью микроскопа Axioplan («Carl Zeiss», Германия).

Через 14 сут после частичной резекции пульпы выявлено, что коронковая часть зуба имеет дефект, заполненный пломбировочным материалом, который также наблюдался на всех последующих сроках. Стенки дефекта ровные, ход канала с жевательной или передней поверхности коронки перпендикулярно к пульпарной камере. Пульпарная камера содержит обрывки волокнистых структур. Волокнистые структуры не содержали клеточных элементов уже на 14-е сутки и в последующем на 30-е и 60-е сутки клеточная популяция не восстанавливалась. Коронка зуба сохраняет целостность своей структуры в течение 30 сут, в последующем к 60-м суткам после повреждения наблюдались трещины и сколы. Пародонтальная щель несколько расширена уже к 14-м суткам и имеет тенденцию к неуклонному расширению в последующие сроки. Собственно, пародонт с повышенной клеточностью: соединительная ткань с большим количеством фибробластоподобных клеток среди волокнистого матрикса. Корни зуба и шейка зуба с очаговыми признаками остеокластической резорбции, чаще в области межкорневой щели. В некоторых случаях было выявлено разобщение прикрепления слизистой оболочки к шейке зуба с формированием узкой, едва заметной щели.

Через 14 сут после частичной резекции пульпы и трансплантации тканеинженерной конструкции, содержащей аутологичные клетки пульпы зуба, выявлено, что коронковая часть зуба имеет дефект, заполненный аморфным белесоватым веществом (пломбировочный материал). Стенки дефекта ровные, ход канала с жевательной или передней поверхности коронки перпендикулярно к пульпарной камере. Пульпарная камера содержит базофильную клеточную структуру — клеточный трансплантат. Устья каналов корней со стороны пульпарной камеры по внутренней поверхности содержат участки с ячеистой структурой, часто богатой сосудами и высокой клеточностью. Указанные структуры напоминают по своему виду грануляционную ткань. Между сосудами нежный рыхлый волокнистый матрикс, который достигал 2/3 объема к 60-м суткам наблюдения. К этому времени на стенках пульпарной камеры заметны отложения дентина в области дна и боковых стенок. А также на поверхности под трансплантатом в виде дентинового мостика. Коронка зуба сохраняет целостность своей структуры на протяжении всех сроков наблюдения. Пародонтальная щель несколько расширена уже к 14-м суткам, однако без значимой прогрессии в течение остального времени наблюдения. Собственно, пародонт с повышенной клеточностью: соединительная ткань с большим количеством фибробластоподобных клеток среди волокнистого матрикса.

В настоящем исследовании было показано, что при трансплантации МСК пульпы в составе фибринового геля в область дефекта пульпы у миниатюрных домашних свиней уже через 14 сут наблюдается формирование рыхлой волокнистой соединительной ткани, в которой формируются дентиновые мостики, что свидетельствует о созревании функционально активных одонтобластов в области регенерации. Эффективность регенерации пульпы при использовании клеточных технологий зависит от возможности скорейшей трансплантации клеток в область дефекта после нарушения целостности пульпарной камеры. Для обеспечения немедленного введения клетки должны быть заранее получены у пациента или донора и криоконсервированы. В целом ряде исследований было показано, что хранение в жидком азоте не влияет на иммунофенотип, пролиферативную активность и дифференцировочный потенциал клеточных культур из пульпы [1, 4, 10]. При этом могут быть заморожены не только культуры стволовых клеток, а также фрагменты интактной пульпы и целые зубы [7, 9, 10]. В настоящее время уже создано несколько банков для хранения биоматериала из пульпы и периодонтальных тканей. Перед трансплантацией клетки иммобилизовали в фибриновом геле, полученном из плазмы крови, обогащенной тромбоцитами (PRP, platelet-rich plasma). Действие факторов роста, высвобождающихся при активации тромбоцитов, таких как PDGF, TGF-β, IGF-I, EGF, VEGF и др. направлено на стимуляцию ан-гиогенеза, хемотаксиса, митотической и метаболической активности клеток, участвующих в регенерации [2, 15].

Регенерация дентина при трансплантации стволовых клеток из выпавших молочных зубов была ранее уже показана в работе на миниатюрных свиньях [16]. Но в данном исследовании наряду с клеточной культурой использовали дополнительные индукторы — щелочную фосфатазу и бета-трикальцийфосфат, которые, несомненно, внесли свой вклад в регенеративный процесс, тогда как в настоящем исследовании регенерация наблюдалась и без дополнительных стимулирующих агентов.

Эффективность применения дентальных клеток пульпы в сочетании с PRP для регенерации ткани пульпы была исследована также на модели дефектов незрелых зубов у собак [17]. В данной группе было показано формирование дентиновых мостиков, что не наблюдалось при трансплантации кровяного сгустка, клеточной культуры или PRP. Однако, по заявлению авторов, образованная ткань имела остеоподобную структуру и располагалась непосредственно в верхушке каналов, а не в пульпарной камере, как в настоящем исследовании, и восстановления именно тканей пульпы показано не было.

Однако накопленный опыт позволяет приступить к проведению ограниченных клинических испытаний метода. Так исследования по оценке эффективности применения клеток из пульпы выпавших молочных зубов для регенерации тканей пульпы пациентов детского и подросткового возраста уже перешли в клиническую стадию и в 2017 г. закончены испытания метода регенерации пульпы после некроза и инфекции пульпы, основанные на применении аутологичных клеток. https://clinicaltrials.gov/ct2/show/study/NCT01814436. К сожалению, результаты данного исследования к настоящему времени не опубликованы.

Таким образом, трансплантация аутологичных клеток пульпы в сочетании с обогащенной тромбоцитами плазмой может стать перспективным направлением в изучении регенерации ткани пульпы при ее частичной резекции, как модели случайного вскрытия пульпарной камеры в клинической практике.

Работа выполнена при поддержке гранта РНФ N16−15−00298.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Источник: www.mediasphera.ru

Общая характеристика дентина

1.Это специализировнная разновидность костной ткани, формирующая основную массу зуба.

2.В коронке покрыт эмалью, в корне цементом.

3.Формируют пульпарную полость и каналы.

4.Способен к истинной регенерации.

5.Содержит 70% неорганических в-ств.

Общий план строения дентина

1.Клетки (одонтобласты, одонтокласты)

2.Межклеточное вещество.

3.Дентиновые канальца.

Слои дентина (по локализации)

1.Наружный (плащевой) дентин.

-Самый твёрдый слой. Коллагеновые волокна располагаются радиально, в виде конусовидных пучков (волокна Корфа), верхушки которых идут внутрь

-волокна Корфа располагются параллельно дентинным канальцам.

-Волокна минерализуются.

2.Промежуточный или зона Томса:

-Располагается на периферии корневого дентина,

-На уровне основания кисточек апикальных отростков одонтобластов.

-Аморфный и слабоминерализованный.

-Выполняет амортизирующую функцию.

-Процессы минерализации идут за пределами волокон в м/кл. веществе.

3.Внутренний (околопульпарный)

— Располагаются параллельно поверхности – тангенциально (волокна Эбнера)

-Располагаясь почти перпендикулярно к дентинным канальцам.

-Волокна минерализованы.

4.Предентин (незрелый, камбиальный)–

-Расположен между пульпой и внутренним слоем дентина (фронтом минерализации), вокруг проксимальных частей отростков одонтобластов.

-Боковых отростков одонтобластов там нет.

-Минерализация волокон происходит за счет матриксных пузырьков.

73. Дентин. Клеточный состав. Морфологическая характеристика одонтобластов на свето- и электронномикроскопическом уровнях. Дифферонная принадлежность и функции одонтобластов и одонтокластов. Их роль в дентинообразовании и дентиноразрушении.

КЛЕТКИ-ОДОНТОБЛАСТЫ

Топографические и структурные характеристики

1.Тела расположены в периферической части пульпы.

2.Апикальные отростки пронизывают дентин по радиусам, в составе дентинных канальцев.

3.Дистальная часть апикального отростка может участвовать в формировании эмалевого веретена.

4.Боковые отростки контактируют друг с другом.

Функции одонтобластов

1.Синтез межклеточного вещества дентина.

2.Его компоновка вокруг собственных отростков.

3.Синтез ферментов минерализации дентинных волокон (матриксные пузырьки).

4.Трофика дентина, эмали и цемента.

5.Регенерация дентина.

6.Рецепция (восприятие механической нагрузки в эмали).

Одонтокласты – разновидность остеокластов

Межклеточное вещество

1.Дентиновые волокна (минерализованный коллаген), имеет жидкокристаллическую структуру.

2.Аморфное вещество /матрикс/ состоит из:

-ГАГ (оссеомукоиды)

-Минеральные соли

Формы компановки и дентиновых волокон

1.Глобулярный дентин:

-Сконцентрирован в зоне Томса.

-Представлен минеральными микрошарами – глобулами гидроксиаппатита, расположенными между волокнами дентина.

-Высоко минерализован.

-Эффект «рессор».

2.Интерглобулярный дентин:

-Располагается между глобулами.

-Низкая степень минерализации волокон.

-Обеспечивает мягкое сцепление глобул.

3.Перитубулярный дентин:

-Формирует стенки дентинных канальцев.

-Волокна высоко минерализованы за счет постоянного воздействия матриксных пузырьков одонтобластов.

-При кариесе разрушается первым, дентинные канальцы расширяются, а дентин становится более пористым.

4.Интертубулярный дентин:

-Располагается между дентинными канальцами.

-Средняя степень минерализации дентинных волокон.

-Кристаллы гидроксиаппатита ориентированы вдоль волокон.

Источник: StudFiles.net


Leave a Comment

Этот сайт использует Akismet для борьбы со спамом. Узнайте как обрабатываются ваши данные комментариев.